液體菌種實驗室檢測方法

2014年12月23日22:11:53
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液體菌種培訓(xùn)

發(fā)酵罐液體菌種在接種前一定要進行實驗室檢測,這是菇行天下一直以來的觀點,為什么一定要檢測,在上一篇文章中菇行天下有詳細的論述?,F(xiàn)在菇行天下給大家介紹一下液體菌種的實驗室檢測方法,普通栽培戶可以借鑒一下,根據(jù)自己的現(xiàn)有條件進行檢測。

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1、取樣:

取樣應(yīng)該在接種前的24小時進行,韓國生產(chǎn)的發(fā)酵罐一般沒有檢測口,只能從接種口取樣,國內(nèi)生產(chǎn)的發(fā)酵罐都有取樣口,取樣環(huán)節(jié)會給發(fā)酵罐帶來染菌的機會,這也是一些工廠不愿意進行取樣檢測的原因,所以取樣必須操作熟練,按照嚴格無菌操作程序進行,取樣容器一般為滅過菌的500ml三角瓶。

2、樣品接種培養(yǎng):

液體菌種樣品培養(yǎng)可以用試管和平皿,菇行天下建議使用平皿檢測,觀察更容易。在無菌狀態(tài)下,將樣品均勻倒在提前制備好的平皿培養(yǎng)基上,封口,在30℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),一個樣品做三個重復(fù)。

3、樣品第一次鏡檢:

用剩余的樣品進行顯微鏡檢測,顯微鏡檢測分兩種,直接檢測和革蘭氏染色,菇行天下建議兩者都要進行。直接檢測,在鏡下很容易觀察到可以游動的桿菌等,而革蘭氏染色的好處是經(jīng)過染色處理,能夠分辨出細胞壁、細胞核等需要染色才能看清的結(jié)構(gòu)。

除了在顯微鏡下觀察是否有細菌存在,還有一點,就是要觀察菌絲的大小、形態(tài)是否符合該品種菌絲的特征,霉菌在液體狀態(tài)也會形成菌絲,比如青霉,青霉的菌絲比食用菌的菌絲要粗得多,還會形成孢子梗。而正常的菌絲,隔膜明顯,鏡下會發(fā)現(xiàn)大量的鎖裝聯(lián)合存在。鏡檢為一次否決,即在鏡下發(fā)現(xiàn)一處細菌,即可判定樣品染菌。

4、確認平皿中培養(yǎng)的樣品

24小時候觀察平皿培養(yǎng)基上的樣品,如果出現(xiàn)非食用菌的菌落,證明樣品不存,帶有細菌,則可以判定發(fā)酵罐染菌。如果平皿表面只有食用菌菌絲萌發(fā),且沒有光滑、奶酪狀的液體出現(xiàn),則判斷發(fā)酵罐正常。

5、對平皿培養(yǎng)基上的樣品進行第二次鏡檢,同樣一次否決。

如果兩次鏡檢和平皿培養(yǎng)都沒有問題,則可做出結(jié)論,該發(fā)酵罐沒有染菌,可以投入生產(chǎn)接種。

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